Mikrobiologiska undersökningar vid misstanke om influensa A/H1N1 (svininfluensa)

16.11.2009

Diagnostik av influensa A(H1N1)v

Laboratoriediagnostik för konstatering av influensa A(H1N1)v-infektion används för alla patienter som behöver sjukhusvård, samt efter eget omdöme även för andra som insjuknat allvarligt och för riskgruppspatienter. Som förstahandstest används PCR och påvisning av antigen (inte egentliga snabbtest). Se Rekommendation till hälso- och sjukvården om antiviral behandling under influensa A(H1N1)v-epidemin.

Influensa A(H1N1)v-viruset avviker genetiskt från de vanliga säsonginfluensavirusen med avseende på flera gener (bl.a. H1 , N1- och NS-genen), vilket innebär att man vid diagnostiken måste ha tillgång till specifika reagenser för detta virus. För närvarande finns det beredskap att detektera virus av typen A(H1N1)v med hjälp av molekylära metoder (PCR och genotypning av framodlat virus) vid HUSLAB, Virologiska institutionen vid Åbo universitet och Institutet för hälsa och välfärd (THL).

Vid misstanke om influensa A(H1N1)v rekommenderar vi inte att att man vid den behandlande enheten använder sig av snabbdiagnostiska test för diagnostisering av influensa. Resultatet av ett snabbtest kan nämligen vara missvisande: falskt positivt (dvs. viruset är ett vanligt säsonginfluensavirus av typ A(H3N2) eller A(H1N1)) eller falskt negativt (dvs. det är inte uteslutet att viruset är av typen A(H1N1)v).

Patientprover (pinnprover från nasofarynx/sputumprover/sugprover från nasofarynx) sänds till HUSLAB eller till Institutionen för virologi vid Åbo universitet enligt det normala förfarandet för insändning av prover, om inte särskilt vägande skäl för användning av expressförsändelse föreligger.

På patientprover (pinnprover från nasofarynx/sputumprover/sugprover från nasofarynx) utförs påvisning av influensa A RNA, influensavirusodling och/eller påvisning av influensa A-antigen. Preliminära svar på PCR fås inom 2-3 vardagar och på virusodling inom en vecka. Lämpliga delar av virusets genom kan sekvenseras för att utreda varifrån det härstammar och för konstaterande av eventuell läkemedelsresistens (resistens mot oseltamivir eller zanamivir).

HUSLAB:
Klinisk mikrobiologi, kontaktuppgifter (på finska)
Förfrågningar under tjänstetid:
Maija Lappalainen, avdelningsöverläkare, 09-191 26772
Laura Mannonen, laborator, 040-838 4009
Hannimari Kallio-Kokko, sjukhusmikrobiolog, 050-427 0476
Jukka Suni, avdelningsläkare 040-838 4012
Förfrågningar under jourtid (vardagar kl. 16.00–8.00 och under veckoslut):
HUSLAB/Virologi, framjouren, 040-837 4010 eller 040-837 4011
HNS/Aurora sjukhus, jourhavande infektionsläkaren, 09-4711, snabbval via HUCS växel 1952 eller 041-510 6138.
Adress för insändning av provförsändelser:
HUSLAB, Klinisk mikrobiologi, Provmottagning, PB 400, 00029 HNS
HUSLAB

Åbo universitet, virologi
Förfrågningar (under tjänstetid):

Raija Vainionpää, avdelningschef, 02-333 7461
Tytti Vuorinen, avdelningschef, 02-333 7461
Matti Waris, överassistent, 02-333 7461
Adress för insändning av provförsändelser:
Åbo universitet, Virologi, Kinakvarnsgatan 13, 20520 Åbo
Kansli, 02-333 7461; Provmottagning, 02-333 7463

Institutet för hälsa och välfärd (THL), Virusinfektionsenheten
Förfrågningar:

Thedi Ziegler, 020-610 8348
Esa Rönkkö, 020-610 8239
Niina Ikonen, 020-610 8413
Ilkka Julkunen 020-610 8372
Adress för insändning av provförsändelser (vardagar kl. 8.00–15.00):

Institutet för hälsa och välfärd (THL), Virusinfektionsenheten, Veterinärsgatan 7, 00580 Helsingfors

Andra (säsong)influensaspecifika undersökningar:

Enheter för klinisk mikrobiologi som utför analyser för detektion av andra typer av influensavirus ombeds sända in alla influensa A positiva prover (där influensa A antigen eller genfragment har påvisats) till THL:s virusinfektionsenhet för noggrannare undersökningar.

Andra differentialdiagnostiska bestämningar:

Andra differentialdiagnostiska bestämningar kan efter konsultation med infektionsläkare övervägas i särskilda fall (allvarliga sjukdomsfall, t.ex. i förening med lunginflammation). Bestämningarna görs i första hand av sjukvårdsdistriktets/sjukhusets/vårdenhetens ansvariga laboratorier för klinisk mikrobiologi.

1. Blododling x 2 (B-BaktVi, KL 1153)

2. Nasofarynxpinn , sputum- eller nasofarynxsugprov för
- påvisning av nukleinsyra (ResVirNhO) eller virusantigen (RvirAg, KL 2579) från respiratoriska virus
- påvisning av pikornavirus-RNA (entero- och rhinovirus, PicoNhO, KL 1917)
- påvisning av mykoplasma-DNA (MypnNhO, KL 4439)
- påvisning av lungklamydia-DNA (CnpnNhO, KL 4384)
- virusodling x 2 (VirVi, KL 2975)

3. Urinprov för påvisning av legionellaantigen i urin (U-LepnAg, KL 4632)

4. Serumprov i akut- och konvalescensfas (parade serumprover tagna med 14 dygns intervall) för påvisning av
- virusantikroppar (S-VirAb, KL 2967)
- Mycoplasma pneumoniae-antikroppar (S-MypnAb, KL 2367)
- klamydiaantikroppar (S-ChlaAb, KL 2060) eller
- Chlamydia pneumoniae-antikroppar (KL 4955)
- legionellaantikroppar (S-LegiAb, KL 2205)

Andra laboratorieundersökningar som kan utföras efter övervägande:
Malariaplasmodier (B-Plas-O, KL 2315): utförs alltid om patienten har feber och har besökt ett malariaområde
Q-feberantikroppar (S-CobuAb, KL 2557)
Salmonellaantikroppar (S-SalmAb, KL 2607)
Legionella, odling (LegVi, KL 2206) och färgning (LepnVr, KL 3219)

Odling av virus för detektering av influensavirus av typen A(H1N1)v (även virusodling av differentialdiagnostiska skäl) bör utföras i laboratorier som uppfyller kriterierna för biologisk säkerhetsnivå 2 (BSL-2) eller högre, och med iakttagande av skärpta säkerhetskrav (på BSL-3-nivå): användning av andningsskydd, skyddsglasögon, skyddsoverall och dubbla handskar. Prov från H1-positiva (eller andra motsvarande influensaviruspositiva) virusodlingar bör sändas till THL.

Se närmare: Krav på skyddsnivå vid virusodling (på finska: Virusviljelyn turvatasovaatimukset)

Provtagning samt förpackning och transport av prover:

Provtagarna bör skydda sig på samma sätt som den övriga personalen: med hjälp av god handhygien, skyddshandskar och skyddsrock/förkläde samt stänkskydd i form av kirurgiskt munskydd och visir eller skyddsglasögon.
Skyddsåtgärder vid vård av influensapatienter
Försiktighetsåtgärdsklasser

Pinnprov från nasofarynx

Provet bör helst tas med en nylon- eller dacronpinne (en s.k. svabbpinne). Pinnen förs in snett nedåt längs näsbotten till cirka 12-14 cm djup. Djupet, som bör mätas på förhand, motsvarar avståndet mellan näsborren och örsnibben; hos vuxna är avståndet alltid >10 cm, hos barn under 2 år 6-7 cm. Svabba nässlemhinnorna med en roterande rörelse, så att det lossnar celler från slemhinnan och fastnar på pinnen. Obs! från blödningskänsliga patienter tas endast näsprov, och provpinnen förs in i näshålan till 3-5 cm djup. Bryt av pinnen i ett torrt laboratorierent provrör. Skriv patientens namn och personbeteckning samt provtagningsdagen på en etikett och fäst den på provröret.

Sugprov från nasofarynx
Provet tas med hjälp av en slemsamlare som är kopplad till en sugkateter. Sugkatetern förs in genom näsborren till nasofarynx och slem från slemhinnan sugs upp. Prov tas från båda näsborrarna. Sänd in slemprovet (2-3 ml) som sådant (i slemsamlarröret) redan samma dag som det togs. Skriv patientens namn och personbeteckning samt provtagningsdagen på en etikett som fästs på provröret.

Förpackning av proverna
Proverna bör förpackas som smittförande prover med iakttagande av gällande anvisningar. Varje provrör ska placeras i en transporthylsa av plast med skruvkork. Transporthylsorna bör lindas in i cellulosavadd och läggas i en återförslutningsbar plastpåse. Märk påsen med påskriften "Misstänkt influensa A(H1N1)v" och placera den tillsammans med remissen i en särskild transportbox. (Täta transporthylsor för transport av prover tillhandahålls av leverantörer av sjukhus- och laboratoriemateriel.) När samma transportbox används för insändning av prover till både analyserande laboratorium och THL, bör proverna packas i skilda plastpåsar. 


Transport av prover till laboratorierna
För att undgå onödiga förseningar i samband med transporten bör provet skickas till det analyserande laboratoriet utan dröjsmål, så att det anländer till laboratoriet senast på morgonen dagen efter provtagningsdagen. Försändelsen bör i regel skickas per post. I undantagsfall kan man använda specialarrangemang.

Anvisningar om sjukhusinterna provtransporter ges av ansvarig enhet.

Ytterligare information:
Institutet för hälsa och välfärd (THL), Virusinfektionsenheten (under tjänstetid)

Thedi Ziegler tfn 020-610 8348
Esa Rönkkö tfn 020-610 8239
Niina Ikonen tfn 020-610 8413
Ilkka Julkunen 020-610 8372
Institutet för hälsa och välfärd (THL), Smittskyddsenheten (under tjänstetid)
Smittskyddsläkaren tfn 020-610 8557 

Svininfluensa – officielt informationspaket >>