SIENTEN ALLERGEENIT JA ANTIGEENIT - NIIDEN KOOSTUMUS JA HENGITYSTEITSE TAPAHTUVAN SIENIALTISTUKSEN AIHEUTTAMAT BIOLOGISET VAIKUTUKSET HIIRELLÄ
Hankkeen vastuuhenkilö: Anna-Liisa Pasanen, Kuopion yliopisto,
Ympäristötieteiden laitos, Pl 1627, 70211 Kuopio,
puh. 017-163 580, e-mail: Annal.Pasanen@uku.fi
TIIVISTELMÄ
Tutkimuksen ensimmäisen osan lopullisena tavoitteena on kehittää
immunokemiallisia testejä, joilla voidaan todeta Stachybotrys-sienen
kontaminaatio mahdollisimman luotettavasti, nopeasti ja helposti jo paikan
päällä tutkittavassa rakennuksessa ja arvioida henkilön
altistumista kyseiselle sienelle spesifisten vasta-ainemääritysten
avulla. Testien kehitys edellyttää kyseiselle sienelle spesifisen
immunogeenisen komponentin tunnistamista. Hankkeen alussa toteutettiin
laajoja kokeita Stachybotrys chartarumin ja muiden kosteissa olosuhteissa
esiintyvien sienilajien välisestä ristireagoinnista sekä
kasvualustan vaikutuksesta S. chartarumin antigeenikoostumukseen. Kokeiden
perusteella tunnistettiin n. 50 kDa:n komponentti, joka on tunnusomainen
S. chartarumille, joka uuttuu helposti sienikasvustosta ja jota on määrällisesti
paljon S. chartarum- kasvustoissa, etenkin sienen kasvaessa selluloosapitoisella
alustalla. Komponentti eristettiin ja puhdistettiin tarkempaa molekyylirakenteen
selvittämistä varten. Tähän mennessä saadut sekvenointitulokset
osoittavat, että kyseessä on glykoproteiini, jonka immunogeenisuus
perustuu proteiinirakenteisiin, ei komponentin sokeriosiin. Projekti jatkuu
31.3.2002 saakka, johon mennessä komponenttia koodaava geeni on tarkoitus
saada eristetyksi. Geenin identifioinnin jälkeen hankkeessa ollaan
valmiita siirtymään rekombinanttiproteiinin ja monoklonaalisten
vasta-aineiden tuottoon ja testaukseen, jotka ovat keskeisimmät työkalut
testien kehittämisessä.
Tutkimuksen toisessa osassa hengitysteitse tapahtuvan sienialtistuksen
immunologisia ja hengitysfunktiovaikutuksia tutkittiin hiirissä. Testiorganismeina
käytettiin osassa 1 valmistettua S. chartarum -uutetta (Sc), Aspergillus
versicolor- uutetta sekä kaikille sienille yhteistä soluseinän
rakennekomponenttia, ß-glukaania. Myös homeiden haihtuvien aineenvaihduntatuotteiden
(MVOC- yhdisteiden) hengitystievaikutuksia tutkittiin samalla hiirimallilla
ja tulosten perusteella arvioitiin MVOC:n kykyä aiheuttaa silmien
ja ylähengitystieärsytystä ihmisissä. Sc:n havaittiin
stimuloivan hiiren immuunijärjestelmää ja aiheuttavan selvän
ylähengitystieärsytysvasteen. Myös A. versicolor ja ß-glukaani
aiheuttivat ylähengitystieärsytystä, mutta ß-glukaani
ei yksin selitä sieniuutteiden ärsytysvastetta. Tulosten perusteella
näyttää myös siltä, että homevauriorakennusten
sisäilmasta mitatut MVOC- pitoisuudet ovat liian alhaisia yksinään
selittämään ylähengitystieoireita. Näin ollen
sekä homeuutteen aikaansaaman ärsytysvasteen aiheuttaja että
ongelmarakennusten ärsytysoireiden aiheuttajat vaativat vielä
lisätutkimuksia, jotta suosituksia ja luotettavia sienialtistuksen
mittausmenetelmiä voidaan esittää.